跳转到主要内容

子宫内膜上皮中arhgap19的调节:在子宫接受性建立中的可能作用

抽象的

背景

子宫容受性的建立是胚胎着床启动的必要条件,并涉及子宫内膜上皮细胞(EECs)的一个重要的形态学转变。连接复合物和膜相关的细胞骨架的重塑是上皮转化的关键。然而,很少知道这一过程是如何调节在接受阶段的脑电图。ARHGAP19是Rho gtpase激活蛋白,参与多种细胞骨架相关事件,包括上皮形态发生。在这里,我们研究了ARHGAP19在子宫内膜上皮转化过程中对子宫容受性建立的作用。对ARHGAP19的上游调节器也进行了研究。

方法

在妊娠早期和人体EEC线上在小鼠子宫中检查了arhgap19表达。通过操纵EECs表达来研究arHGAP19的作用。通过蛋白质印迹和免疫荧光检查arhgap19在EEC中的结蛋白的影响。通过扫描电子显微镜检查ArHGAP19对微绒毛的影响。使用在线数据库预测上游MicroRNA(miRNA)并由双荧光素酶测定验证。这在活的有机体内体外miRNA对内源性arhgap19的影响通过子宫注射miRNA Agomirs检验并转染miRNA模拟物或抑制剂。

结果

arhgap19在接受小鼠子宫和人体EEC中上调。在非接受EEC中的ArhGAP19的过度表达下调了结蛋白的表达并导致它们的再分配。同时,上调arhgap19重组了eecs的细胞骨架结构,导致微血管的下降和细胞配置的变化。这些变化削弱了上皮细胞极性,并促进了非接受EEC的过渡到接受表型。此外,MIR-192-5P,在维持上皮性能方面发挥关键作用的miRNA被验证为arhgap19的上游调节剂。

结论

这些结果表明,通过调节结蛋白和膜相关的细胞骨架的重塑,arhGAP19可以促进EECs从非接受状态的过渡。

背景

胚胎植入的开始需要将母体子宫内膜分化为特殊的生理状态以接受胚胎粘附,称为接受状态[1].在从非接受状态转变为接受状态期间,子宫内膜的组分,包括上皮和基质,经历显着的变化。作为母体和胚胎组织之间的第一次接触,潜伏的上皮被认为在建立接受性中发挥关键作用[23.].非受纳子宫内膜上皮细胞(EECs)表现出典型上皮细胞的极化特征,具有明显的顶端和基底外侧域。细胞通过多种类型的连接复合体(如紧密连接、粘附连接、桥粒)紧密连接,形成二维平面[4.].同时,非接受EEC的顶表面覆盖有含有型肌动蛋白的微绒毛,并没有表现出粘合性能[5.].上皮细胞的这些特征使腔上皮的囊胚粘附和侵袭的屏障。然而,在接受阶段期间,EECS经历极性丧失,细胞 - 细胞粘附变弱。此外,从柱状形状到立方体形状的细胞的构造,以及表面撤退上的微毛虫,这使得顶端膜平坦有利于胚胎附件[26.].越来越多的证据表明,连接复合体的重塑和肌动蛋白细胞骨架的重组是调控细胞形态变化的关键因素,而细胞骨架调控因子,如rho家族GTPases及其调控因子在这一过程中发挥了重要作用[7.8.].然而,关于这些细胞骨架调节剂在建立子宫接受性的上皮转化过程中是如何行为的,我们知之甚少。

RHO家族小GTP酶用作调节多种细胞功能的分子开关,包括各种细胞骨架相关的事件和基因转录。Rho GTPase-Activating蛋白质(rhogaps)是在细胞细胞骨骼组织,增殖,分化,粘附性中至关重要的所有真核生物中发现的RHO GTP酶的主要类调节因子之一8.9.].arhgap19是rhogap家族的成员,并参与上皮形态发生的调节[10],它是否参与了子宫受体建立过程中的上皮转化尚不清楚。在本研究中,我们揭示了ARHGAP19在早孕小鼠子宫和人脑电图中的表达模式。通过调控EECs中ARHGAP19的表达,我们发现ARHGAP19的上调通过调节连接复合体和细胞骨架结构的重构,促进了EECs从非接受表型向接受表型的转变。此外,我们还发现ARHGAP19的表达受到miR-192-5p的调控。这些结果提示ARHGAP19可能通过调控上皮形态参与子宫内膜容受性的建立。

方法

动物治疗和伦理考虑

健康ICR小鼠购自浙江大学实验动物中心(中国浙江杭州),饲养在受控光照周期(12小时光照/ 12小时黑暗)的环境中,并可自由获得食物和水。夜间(下午6:00)将8 ~ 10周龄雄性和6 ~ 8周龄雌性按1:1比例关入笼内诱导交配,阴道塞状显像的早晨指定为妊娠第1天(D1)。取D1、D4、D5子宫进行RNA和蛋白质测定。静脉注射0.1 ml 1%芝加哥蓝(Sigma, St Louis, MO, USA)观察D5着床部位(IMS) [11[两个植入部位之间的子宫组织被指定为植入间位点(IIS)。在指定的一天,通过颈椎脱位安乐死小鼠[12]收集子宫。对于每个实验,同一组中的三到五只小鼠的子宫被设定为生物重复。

所有方案均经浙江大学动物保护与使用专业委员会(ZJU20190151)批准。

细胞培养和转染

人体子宫内膜腺瘤性癌细胞系HEC-1-A,Ishikawa和人胚胎肾(HEK)293 T细胞系(HEK293T)购自中国科学院(上海,中国)和塑料培养烧瓶有5%的CO2在37摄氏度的空气中。将HEC-1-A细胞接种于McCoy’s 5A培养基(Invitrogen公司,美国卡尔斯巴德)和Ishikawa培养基中,HEK293T细胞接种于DMEM培养基(Invitrogen公司)中。所有培养基均添加10%胎牛血清、100 U青霉素、100µg链霉素(Invitrogen)。使用Lipofectamine 2000 (Invitrogen)转染ARHGAP19 cDNA(2µg)、miR-192-5p模拟物(50 nM, GenePharma,中国)或抑制剂(100 nM, GenePharma)。转染48 h后收集细胞用于进一步研究。

在活的有机体内注射miRNA Agomirs

妊娠D3的女性(上午8点)麻醉并手术暴露子宫。1侧子宫角注射miR-192-5p agomir (GenePharma) 10 nmol/5 ul,对侧子宫角注射等量的争光对照。妊娠第5天处死小鼠,分别取子宫角进行蛋白检测。

RNA提取和RT-QPCR

根据制造商的说明,使用Trizol(Invitrogen)从子宫和子宫内膜细胞中提取总RNA。使用Nanodrop2000仪器(Thermo Fisher Scientific,Waltham,Ma,USA)检查RNA的量。对于mRNA检测,使用快速GDNA分布RT Supermix套件(天根生物技术,中国)合成总RNA(2μg)cDNA。通过使用真正的通用颜色预混件(Sybr Green)试剂盒(Tiangen Biotech),通过QPCR评估基因表达,用2μL合成的cDNA进行评估。对于miRNA检测,使用总RNA(1μg)使用Mircute Plus MiRNA第一链CDNA套件(天根生物技术)和MiR-192-5P使用Mircute Plus MiRNA QPCR(Sybr Green)试剂盒(Sybr Green)QPCR(天根生物技术)。QPCR反应在SteponePlus™实时PCR系统中进行(应用生物系统,福斯特城,USA,USA)。GAPDH / U6被设定为标准化控制。使用2计算相对量CT.方法。所有引物的序列见表1

表1 RT-qPCR引物序列

免疫印迹分析

使用补充有1mM苯基甲基磺酰基(Beyotime Biotechnology,Shanghai,Shanghai,China),蛋白质裂解物衍生自组织和培养细胞。使用增强的BCA蛋白质测定试剂盒(Beyotime Biotechnology)检测蛋白质浓度。将裂解物进行10%十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)并转移到PVDF膜(Milliporeigma,Burlington,Ma,USA)。然后将膜在PBS-Tween中的5%非脂肪奶粉中封闭,并与ARHGAP19的一抗孵育(1:500,SC-398428,Santa Cruz Biotechnology,Santa Cruz,CA,USA),E-Cadherin(1:2000,A3044,武汉嫁接技术,武汉,4°C过夜。用PBST洗涤后,将膜与辣根过氧化物酶(HRP)缀合的二抗(1:5000,嫁接技术)温育2小时,并使用ECL套件(BeyoTime Biotechnology)通过化学发光检测。

免疫荧光

用4%多聚甲醛固定细胞30分钟,然后用PBS中的0.3%Triton X -100(BeyoTime Biotechnology)渗透。在室温下用4%BSA封闭1小时后,在4℃下将样品与对E-CDADHERIN(1:100,A3044,A3044,嫁写的技术)或OCLN(1:100,SANTA CRUZ生物技术)一起孵育样品过夜。AlexaFluor®594-共轭山羊多克隆用作二抗(1:500,嫁接技术)。用DAPI(BeyoTime Biotechnology)进行核染色,之后使用Zeiss LSM780共聚焦显微镜系统(Zeiss)对细胞进行成像。

扫描电子显微镜(SEM)

HEC-1-A细胞在2.5%戊二醛中固定在2.5%戊二醛,固定在十六氧化物1%锇中。用PBS洗涤样品后,将它们用一系列乙醇孵育脱水。通过在95%乙醇中孵育继续脱水,然后是绝对乙醇。使用超高分辨率扫描电子显微镜(SU8010,Hitachi,Japan)在浙江大学(中国)分析中心进行细胞表面的SEM分析。

双荧光素酶活性测定

一共有6 × 104.转染前24 h将HEK293T细胞接种于24孔培养皿中。500ng pmirGLO载体包含野生型或突变型片段Arhgap193’utr (Promega, Madison, WI, USA), 50nm miR-192-5p或乱码对照使用Lipofectamine 2000 (Invitrogen)共转染。转染48小时后,使用双荧光素酶报告检测系统(Promega)检测细胞提取物的荧光素酶活性。利用肾素酶活性将转染效率归一化。目的物3’utr的克隆细节如下:利用5’引物5’- GAGCATGGAGGTGTGTGATCT-3’和3’引物5’- GTCTATTCTGCACTGGATCACAG-3’从小鼠Arhgap19 3’utr中扩增出一个589 bp的片段。突变的miR-192-5p结合位点经过修饰合成(野生型:5’taggtca3’;突变体5 ' gctttca3 ')。

统计数据

所有实验均以均数±SDs表示。两组间的统计差异采用双尾非配对学生t检验进行分析。多组间比较采用单因素方差分析(ANOVA),然后采用Dunnett检验。统计学意义定义为P.< 0.05。

结果

arhgap19在接受小鼠子宫和人体eecs中上调

在小鼠中,子宫对着床的敏感性可分为三个阶段:接受前(妊娠的D1-D3)、接受(D4-D5)和难治性(D5以上)。植入发生在D4的午夜[1314].我们在小鼠早期妊娠期间检查了arhgap19的表达模式,发现与预处合相比,在接受和植入阶段期间上调arhgap19 mRNA和蛋白。另外,植入位点中的arhgap19的表达明显高于植入间位点中的表达(图。1A-C)。我们进一步研究了arhgap19在非接受和接受的人体EEC线中的表达。HEC-1-A细胞系显示了高偏振上皮细胞的细胞间触点的完整图案,以及用于滋养细胞样细胞的较差的粘合性能,其通常用作体外非接受子宫上皮模型。而Ishikawa细胞系表现出温和的细胞极性,并对滋养层样细胞具有根尖粘附性,这使其成为接受性子宫上皮的良好模型[15161718].ARHGAP19表达检测结果显示,HEC-1-A细胞中ARHGAP19 mRNA表达水平高于Ishikawa细胞。而HEC-1-A细胞中ARHGAP19蛋白水平明显低于Ishikawa细胞(图1)。1D-F)。总之,这些结果表明arhgap19在接受的子宫和ECC中上调。

图1
图1

芳烃中的表达在小鼠子宫和人子宫内膜上皮细胞(EEC)线中的表达。一种妊娠早期小鼠子宫中arhgap19 mRNA的检测。IMS,植入网站。IIS,植入间位点。B.妊娠早期小鼠子宫中arhgap19蛋白的检测。C鼠ARHGAP19蛋白的密度分析B.D.接收细胞系(Ishikawa)和非接收细胞系(HEC-1-A)中ARHGAP19 mRNA的检测。E.EEC线路中人arhgap19蛋白的检测。F呈现人arhgap19蛋白的密度测定分析E..*P. < 0.05, **P. < 0.01, ***P.< 0.001, * * * *P.< 0.0001

ARHGAP19通过调节连接复合物和膜相关细胞骨架的重塑,诱导EECs的形态学改变

考虑到接受条件下的子宫组织和细胞中ARHGAP19蛋白水平相对较高,我们推测ARHGAP19可能在建立接受性方面发挥了作用。为了验证这一假设,我们增加了非接受HEC-1-A细胞中ARHGAP19的水平,并观察这些细胞是否能够转移到接受表型。

如图1所示。2a,转染ARHGAP19后HEC-1-A细胞形态发生明显变化。正常情况下,HEC-1-A细胞形成有序的立方到柱状细胞单层,如图打乱对照组所示。由于细胞高度极化,通过稳定的连接紧密连接,在细胞集落的边缘可以看到明显的边界。然而,过表达ARHGAP19的HEC-1-A细胞呈更圆的形状,并倾向于堆积生长。细胞间连接变弱,细胞集落边界模糊。这一现象表明ARHGAP19改变了HEC-1-A细胞间的连接。

图2
图2.

arhgap19过表达诱导结络合物的重塑。一种转染ARHGAP19或干扰对照(Scr)的HEC-1-A细胞的代表性图像。刻度条,100µm。箭头指向细胞集落的边界。B.转染ARHGAP19后HEC-1-A细胞中E-cadherin表达的检测CIF在arhGAP19过表达细胞中的e-cadherin定位的三维重建。秤杆,10μm。*代表单元格的顶点侧。D.3D重建含有IF在arhgap19过表达细胞中的occludin定位。秤杆,10μm。*代表单元格的顶点侧。箭头指向细胞 - 细胞接触中的occludin

连接蛋白是连接细胞的关键元素并给上皮细胞它们独特的性格。接下来,我们检查了arhgap19对关键结蛋白表达的影响。E-cadherin是在上皮细胞中形成粘附结的关键组分。它在横向膜中表达,并在偏振上皮细胞中保持细胞 - 细胞粘附[1920.].arhgap19的过表达显着降低了HEC-1-α细胞中的E-Cadherin表达(图。2b).此外,免疫荧光结果显示过表达ARHGAP19细胞膜内E-cadherin分布改变(图)。2c).与E-cadherin局限于侧膜的对照组细胞不同,ARHGAP19过表达细胞的E-cadherin在顶端和外侧均呈随机分布。我们进一步检测了Occludin的表达,它在紧密连接的形成和调控中起作用,发现过表达ARHGAP19降低了HEC-1-A细胞中细胞-细胞接触处的Occludin表达(图)。2d)。这些结果表明,arhgap19诱导结蛋白的重塑。

除了结蛋白的重塑外,细胞骨架元素,尤其是膜相关的细胞骨架,在接受阶段经历自己的转化形式。特别值得注意的是在顶端膜上含有含有蛋白的微绒毛的静脉曲张[21].我们进一步研究了Arhgap19如何影响HEC-1-A细胞中微血管的表达模式。SEM分析显示,上调arhgap19显着降低了微绒毛的数量和长度(图。3.a).此外,ARHGAP19还下调了Villin (Vil)编码基因的表达(图。3.b),一种促进MicroVilli形成的肌动蛋白结合蛋白[22].结合arhgap19改变上皮细胞的构型(从柱形形状到圆形),显示arhgap19导致细胞骨架的重组类似于在建立接受性时上皮转化期间发生的变化。

图3
图3.

ARHGAP19过表达会破坏微绒毛的形成。一种ARHGAP19转染HEC-1-A细胞的代表性扫描电镜图像。比例条,5µm。B.HEC-1-A与arhgap19转染的细胞中villin mRNA的检测。****P.< 0.0001

miR-192-5p是arhgap19的上游稳压器

作为RhoGAP家族的一员,ARHGAP19参与了多个细胞骨架相关的细胞事件。然而,人们对ARHGAP19是如何被调控的知之甚少。我们注意到与Ishikawa细胞相比,HEC-1-A细胞ARHGAP19 mRNA水平较高,但蛋白水平较低,提示其可能存在转录后调控。MicroRNAs (miRNAs)是在多种真核细胞中直接抑制靶基因的小的非编码rna [23].因此,我们可能会受到miRNA调节的疑似arhgap19。

我们之前报道过,miR-192-5p在小鼠早孕时EECs中发挥作用,并被下调(图。4.)(24].我们进一步研究了MIR-192-5P在人体EEC系中的表达,发现HEC-1-A细胞具有比Ishikawa细胞更高的miR-192-5p水平(图。4.b). miR-192-5p的这些表达趋势均与ARHGAP19相反。更重要的是,生物信息学分析使用三个不同的在线平台(TargetScan,http://www.targetscan.org/vert_72/,mirdb,http://mirdb.org/miRWalk,http://mirwalk.umm.uni-heidelberg.de/)表明,ARHGAP19是miR-192-5p在小鼠和人类中的潜在靶点(图。4.C)。为了确定miR-192-5p和arhgap19之间的直接靶标关系,进行了双荧光素酶报告分析。产生含有小鼠arhgap19的野生型或突变体3'UTR片段的荧光素酶记录者,并在HEK293T细胞中用miR-192-5p模拟或加扰的控制序列共转染(图。4.d)。如图1所示。4.e, miR-192-5p模拟物导致荧光素酶活性显著降低36.5%,miR-192-5p结合位点的突变取消了敲除效应。我们进一步研究了miR-192-5p对小鼠子宫和人EEC内源性ARHGAP19表达的影响。如图1所示。4.f,发现ARHGAP19下调在活的有机体内miR-192-5p agomir处理小鼠子宫角。此外,在HEC-1-A和Ishikawa细胞中,过表达miR-192-5p诱导内源性ARHGAP19的显著减少,而抑制miR-192-5p则释放其表达。这些结果表明,ARHGAP19是由miR-192-5p直接调控的。

图4
图4.

ARHGAP19受miR-192-5p调控。一种妊娠早期小鼠子宫中MiR-192-5p的表达。B.MiR-192-5P在人体EEC线路中表达。CmiR-192-5p的推定结合位点在小鼠和人类的arhgap19的3'Utr区。D.野生型和突变体arhGAP19-3'UTR载体结构的示意图。突变载体是通过在3'URR区域中的miR-192-5p的推定结合位点的突变产生的。E.HEK293T细胞中的相对荧光素酶活性与MIR-192-5P模拟,加扰对照和坯料,野生型(WT)或突变体(MUT)arhGAP19 3'UTR载体共转染。FMiR-192-5p在小鼠子宫(左)和人脑电图(右)中调节ARHGAP19的表达。*P. < 0.05, **P. < 0.01, ***P.< 0.001, * * * *P.< 0.0001

讨论

在胚胎着床前,子宫内膜上皮发生了显著的形态变化,在顶端和基底侧的质膜发生了形态学和功能的改变。这些改变最终导致细胞极性降低,根尖粘附性增强,促进胚胎粘附和侵袭[2].连接复合体的重塑和细胞骨架的重组在调控细胞形态发生中起着重要作用;然而,令人惊讶的是,很少有研究是关于细胞骨架调控在妊娠早期上皮转化过程中的作用。在本研究中,我们阐明了一个细胞骨架相关蛋白ARHGAP19在调控EECs形态转化中建立受体的作用。

arhgap19属于rhogap家族,促进内在GTP水解的GTP酶活性,从而灭活的rho蛋白活性[9.].目前,对arhgap19的功能性研究非常有限,但基于其表达模式,即胎儿组织和一些特定细胞类型(例如造血细胞)的高度表达,试图涉及arhgap19可以参与调节发展过程[2526].虽然表征较少,但涉及arhgap19的目前的研究表明它参与了细胞骨架介导的细胞形态变化的调节。例如,通过调节RhOA /岩石信号传导,已显示arhgap19在淋巴细胞早期有丝分裂中调节细胞伸长和细胞因子[26].在另一项研究中,ARHGAP19在表皮细胞中功能的缺失被报道可诱导肌动蛋白细胞骨架重组,改变细胞极性,并刺激粘附连接形成[10].在本研究中,我们探讨了ARHGAP19在子宫内膜上皮形态中的调控作用。尽管ARHGAP19在EECs中表达较低,但其在接受细胞和非接受细胞中的表达存在显著差异。通过改变ARHGAP19的表达水平,我们发现ARHGAP19的表达上调可以诱导非受纳细胞获得部分受纳表型。

在建立接受性过程中,EECs侧膜最显著的变化是连接复合体的重塑[2].E-cadherin是CA2+- 在上皮细胞中表达的依赖性细胞粘附分子,并在维持上皮完整性和极性方面发挥关键作用[4.].EEC中E-Cadherin的下调允许滋养细胞的粘附性和渗透,因此对于植入引发至关重要[2728].与先前的研究一致[10),我们发现ARHGAP19通过抑制E-cadherin的表达而诱导黏附连接蛋白的重构。此外,我们发现ARHGAP19过表达导致E-cadherin在极化的ec中非典型分布,即随机分布到整个质膜域,而不是局限于侧面域。e -钙粘蛋白的再分配可能是由于与连环蛋白(即β-连环蛋白和α-连环蛋白)和肌动蛋白丝相互作用的改变,这些改变随后改变了细胞-细胞粘附[29].Thie等人。报道了在另一种接受人EEC线R195-2中的E-Cadherin的随机分布。这些细胞通常缺乏典型上皮细胞的偏振结构,并且表现出强烈的堆积倾向[1518].有趣的是,在我们的研究中,我们还观察到HEC-1-A细胞的堆积趋势arhgap19过表达后,我们推测可能与E-cadherin的重新分布有关。除了粘附结蛋白的改变之外,arhgap19过表达还减少了细胞 - 细胞界面在细胞 - 细胞界面处的紧密结组分闭塞蛋白的表达。这些结果进一步加强了arhgap19诱导的结射重塑,可能导致上皮极性丧失。

在接受期,EECs的顶膜经历了显著的形态学改变,包括包含肌动蛋白的微绒毛的退缩和终端网的移除[21].在妊娠早期的几种物种中发现了这些现象,被认为是胚胎附件的先决条件[2].在目前的研究中,我们发现upregulation ARHGAP19能够导致微绒毛减少和表达的差别导致了对这些基因编码Villin,一个calcium-regulated actin-binding蛋白质调节肌动蛋白丝的结构和组装,在微绒毛的形态发生中扮演着重要角色2230.].这些结果表明,ARHGAP19诱导了膜相关的细胞骨架重组,促使膜形态的改变,并允许细胞获得受体相关表型。

在本研究中,我们也发现ARHGAP19受到miR-192-5p的调控。MiR-192位于小鼠的19号染色体和人类的11号染色体上。成熟的miR-192-5p序列在小鼠和人类中是相同的。对不同组织的研究表明,miR-192-5p在上皮细胞中富集,并参与决定或维持细胞类型特异性特征,包括上皮分化和离子转运[313233].我们以前的研究[24]表明miR-192-5p在接受期和植入期显著下调,与ARHGAP19的表达趋势相反。抑制HEC-1-A细胞中miR-192-5p的功能,会抑制细胞-细胞界面E-cadherin的表达,减少根尖微绒毛的形成,这与Arhgap19的过表达类似。本研究证实ARHGAP19是miR-192-5p的靶基因。我们推测,在妊娠早期,子宫内膜可能通过下调miR-192-5p来释放ARHGAP19的表达,进而促进上皮形态转化。

结论

综上所述,本研究探讨了细胞骨架相关因子ARHGAP19在EECs中的作用,该因子可能通过调节连接复合物和膜相关细胞骨架的重构,促进上皮细胞从非接受状态向接受状态的转变。这些结果为理解认知能力建立的机制提供了理论参考。然而,ARHGAP19是否通过其GAP活性影响上皮形态尚不清楚。需要进一步的研究来揭示arhgap19调控的下游因素。

可用性数据和材料

本研究中产生或分析的所有数据均包含在本文中。

缩写

电:

子宫内膜上皮细胞

IIS:

Inter-implanation网站

IMS:

植入网站

RhoGAPs:

rho GTPase-活化蛋白

SEM:

扫描电子显微镜

参考文献

  1. 1.

    Achache H,Revel A.子宫内膜接受标记,成功胚胎植入之旅。嗡嗡声更新。2006; 12:731-46。

    文章谷歌学术搜索

  2. 2.

    墨菲CR,子宫容受性和质膜转化。细胞研究》2004;14:259 - 67。

    文章谷歌学术搜索

  3. 3.

    叶霞:子宫腔上皮是胚胎着床的过渡通道。Trends Endocrinol Metab. 2020; 31:65 - 80。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  4. 4.

    Takeichi M.动态触点:重新排列粘附结以驱动上皮重塑。NAT Rev Mol Cell Biol。2014; 15:397-410。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  5. 5.

    丹麦HW。子宫内膜接受性:异常上皮的细胞生物学方面。回顾。安娜特。1994年; 176:53-60。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  6. 6.

    Tu Z,王Q,Cui T,Wang J,Ran H,Bao H等。通过PAK1-ERM信号传导的子宫RAC1引导正常的腔上皮完整性,其中小鼠中的胚胎植入植入。细胞死亡有所不同。2016; 23:169-81。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  7. 7.

    Rho GTPases和肌动蛋白骨架。科学。1998;279:509-14。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  8. 8.

    Fukata M,Kaibuchi K. Rho-Family GTP酶在钙粘蛋白介导的细胞 - 细胞粘附中。NAT Rev Mol Cell Bio。2001; 2:887-97。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  9. 9.

    Moon SY, Zheng Y. Rho,在细胞调节中激活gtpase蛋白。《细胞生物学》2003;13:13-22。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  10. 10.

    Amelio I, Lena AM, Viticchiè G, Shalom-Feuerstein R, Terrinoni A, Dinsdale D, et al. miR-24通过控制肌动蛋白粘附和细胞迁移触发表皮分化。细胞生物学杂志。2012;199:347-63。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  11. 11.

    Daikoku T,Cha J,Sun X,Tranguch S,Xie H,Fujita T等人。通过改变子宫接收性,子宫内部缺失MSX Homeobox基因抑制胚泡植入。DEV细胞。2011; 21:1014-25。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  12. 12.

    托管wh。操纵鼠标胚胎(第2 EDN)。1995,11:422-420。

  13. 13.

    孙昕,蔡静。人工植入的机制:成功妊娠的策略。Nat医学。2012;18:1754 - 67。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  14. 14.

    王浩,戴斯凯。胚胎植入的路线图:来自小鼠模型的线索。Nat Rev Genet, 2006; 7:185-99。

    文章谷歌学术搜索

  15. 15.

    Thie M,Fuchs P,Butz S,Sieckmann F,Hoschutzky H,Kemler R等。子宫上皮细胞的顶端表面的粘合性:结络合完整性的作用。EUR JBelt Biol。1996; 70:221-32。

    CAS.PubMed谷歌学术搜索

  16. 16.

    作者简介:Thie M, Herter P, Pommerenke H, Durr F, Sieckmann F, Nebe B等。滋养细胞在人子宫内膜单层游离表面的黏附性与肌动蛋白细胞骨架有关。Mol Hum repd . 1997; 3:275-83。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  17. 17.

    Martin JC, Jasper MJ, Valbuena D, Meseguer M, Remohi J, Pellicer A等。培养的子宫内膜源性细胞黏附性增加与moesin表达的缺失有关。天线转换开关杂志。2000;63:1370-6。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  18. 18.

    Hannan NJ, Paiva P, Dimitriadis E, Salamonsen LA。人类胚胎植入研究的模型:细胞系的选择?天线转换开关杂志。2010;82:235-45。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  19. 19.

    德赛,高磊,拉加万,刘文福,陈永昌。细胞极性通过e -钙粘蛋白引起细胞粘附。细胞科学学报;2009;

    CAS.文章谷歌学术搜索

  20. 20.

    Royer C,Lu X.上皮细胞极性:针对癌症的主要门卫?细胞死亡有所不同。2011; 18:1470-7。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  21. 21.

    子宫上皮细胞的细胞骨架:子宫接受性和质膜转化的新参与者。更新,1995;1:567-80。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  22. 22.

    Khurana S,George Sp。肌动蛋白结合蛋白的细胞结构和功能调节:Villin的观点。费用。2008; 582:2128-39。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  23. 23.

    巴特德DPMetazoan microRNAS。细胞。2018; 173:20-51。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  24. 24.

    在胚胎着床过程中,miR-192-5p通过阻碍上皮细胞的转化而抑制子宫容受性的形成。以及动物生殖部。2020;技术部157:360 - 71。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  25. 25.

    LV L,Xu J,Zhao S,Chen C,Zhao X,Gu S等人。含人rhogap域内基因的序列分析及其在人多组织中表达的表征。DNA SEQ。2007; 18:184-9。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  26. 26.

    David MD,Petit D,Bertoglio J. rhogap arhgap19控制T淋巴细胞中的细胞因子和染色体隔离。J Cell SCI。2014; 127:400-10。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  27. 27.

    Paria BC, Zhao X, Das SK, Dey SK, Yoshinaga K. zo - occludens-1和E-cadherin在小鼠子宫中随着着床和蜕膜化的开始协调表达。Dev杂志。1999;208:488 - 501。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  28. 28.

    关键词:降钙素,子宫植入,e -钙粘蛋白,细胞凋亡生物化学杂志。2002;277:46447-55。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  29. 29.

    Cavey M,Rauzi M,Lenne PF,Lecuit T.一种用于稳定和固定E-Cadherin的双层机制。自然。2008; 453:751-6。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  30. 30.

    肌动蛋白结合蛋白的结构和功能。Bioessays。1990;12:403-8。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  31. 31。

    miR-192和醛固酮对WNK1表达的调控。J Am Soc Nephrol. 2010; 21:1724-31。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  32. 32.

    mladinov d,liu y,mattson dl,梁我。MicroRNAS有助于维持细胞类型特异性的生理特性:miR-192靶标na + / k +-AtPaseβ1.核酸Res。2013; 41:1273-83。

    CAS.文章谷歌学术搜索

  33. 33.

    Morimoto A,Kannari M,Tsuchida Y,Sasaki S,Saito C,Matsuta T等人。HNF4Alpha-microRNA-194/192信号轴维持肝细胞功能。J Biol Chem。2017; 292:10574-85。

    CAS.文章谷歌学术搜索

下载参考

确认

不适用。

资金

本研究由浙江省团队科技特派员项目(桐乡)和湖州市农业科技创新团队项目(2019HN01)资助。

作者信息

从属关系

作者

贡献

JJL,QT和ZGW设计了这项研究。KL,KC,Jyg对小鼠进行了实验。JJL,TQ,JYH在人类EEC线上进行了实验。JJL以书面形式为主要贡献者。SS和ZGW审核并编辑了稿件。所有作者阅读并认可的终稿。

相应的作者

对应于王光王

道德声明

伦理批准和同意参与

不适用。

同意出版物

不适用。

利益争夺

作者们宣称他们没有相互竞争的利益。

附加信息

出版商的注意事项

新利国际娱乐Springer Nature在发表地图和机构附属机构中的司法管辖权索赔方面仍然是中立的。

权利和权限

开放获取本文根据创意公约归因于4.0国际许可证,这允许在任何中或格式中使用,共享,适应,分发和复制,只要您向原始作者和来源提供适当的信贷,提供了一个链接到Creative Commons许可证,并指出是否进行了更改。除非信用额度另有说明,否则本文中的图像或其他第三方材料包含在文章的创造性公共许可证中,除非信用额度另有说明。如果物品不包含在物品的创造性的公共许可证中,法定规定不允许您的预期用途或超过允许使用,您需要直接从版权所有者获得许可。要查看本许可证的副本,请访问http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.“创作共用公共领域”豁免书(http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/)适用于本文提供的数据,除非在数据的信用额度中另有说明。

重印和权限

关于这篇文章

通过十字标记验证货币和真实性

引用这篇文章

梁,J.,Li,K。,陈,K。等等。子宫内膜上皮中arhgap19的调节:在子宫接收性建立中的可能作用。天线转换开关性杂志19,2(2021)。https://doi.org/10.1186/s12958-020-00689-7.

下载引用

关键词

  • ARHGAP19
  • 子宫接受性
  • 上皮改造
  • mir - 192 - 5 - p
\